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本文標題:"酵母菌株-釀酒酵母微觀分析圖像顯微鏡"

發布者:yiyi ------ 分類: 行業動態 ------ 人瀏覽過-----時間:2017-8-30 0:0:6

酵母菌株-釀酒酵母微觀分析圖像顯微鏡

 
研究粉已經被分泌的淀粉酶水解者從泡盛酒曲霉(Aspergillusawam
ori)分離了全長的葡萄糖淀粉酶的cDNA,克隆到釀酒酵母質粒上,
并受到酵母烯醇酶EN01基因啟動子和轉錄終止子的調控。實驗室構
建的一種攜帶葡萄糖淀粉酶cDNA質粒的釀酒酵母具有這種活性,可
以將可溶的淀粉發酵成為酒精,這表明上述方法可行。
    但遺憾的是,這種實驗室釀酒酵母菌株的某些性質不適用于商
業生產,比;如它不耐高濃度的酒精;不能有效表達葡萄糖淀粉酶
cDNA;在沒有維持質粒存在的特殊條件(選擇壓力)下,將大量遺失
質粒。這些問題并不是難以克服的,首先通過消除質粒上EN01啟動
子上175 bp的負調控區域,葡萄糖淀粉酶的表達水平幾乎增加了5
倍;其次通過消除酵母的復制起點,添加與酵母染色體同源的DNA
片段,構建整合型載體。這種形式的質粒,能將完整的葡萄糖淀粉
酶基因整合進入染色體位點,穩定保存。還可以利用另一種耐酒精
的釀酒酵母(啤酒酵母)作為宿主菌,轉化整合型載體。
    通過這些改造,研究者制造了兩種新的酵母菌株。這些菌株比
天然存在分解淀粉的凝聚性酒精酵母(Saccharomycesdiastaticus)
更好,該酵母與釀酒酵母相近,可以水解和發酵可溶性淀粉(表13
.4)。帶有整合型葡萄糖淀粉酶基因的啤酒酵母效果優于多拷貝游
離型基因的實驗室菌株。這種差異反映了質粒的不穩定性造成葡萄
糖淀粉酶基因的丟失。只有轉入克隆的葡萄糖淀粉酶基因,實驗室
菌株和釀酒酵母的啤酒酵母菌株才能利用可溶性淀粉。不論是游離
還是整合,泡盛酒曲霉葡萄糖淀粉酶的cDNA都是在正N01,調控信
號的控制之下,其中去除了175 bp的負調控區域。質粒在選擇壓力
下保存。
 

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