本文標題："植物化石粉粒超微結構分析電子顯微鏡技術"
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植物化石粉粒超微結構分析電子顯微鏡技術
過量染液的沉淀產生的假象可能被解釋為花粉或孢子壁的不同組成成分
，或者染色過度，從而導致觀察不到特定結構。僅僅根據無法控制染色方
案的幾張切片來討論有關壁層個體發育的結論是不準確的；同時，僅僅根
據一個花粉粒的幾張切片，可能會觀察不到萌發孔器或特定細小結構。并
非所有的孢粉顆粒都處于相同的發育階段，同時其保存條件也不盡相同，
故沒有一種通用染色方案。這樣就要求研究人員對不同濃度的染液摸索其
染色時間，并將染色方案仔細地記述在論文的切片方法中。
包埋和定位
除了需要對許多顆粒切片，在超微切片之前，需要對每個花粉?；蜴?/div>
子進行準確定位。有幾種方法可用來定位，一種方法是用薄晶片來包埋標
本，使得在切片時能看到并定位顆粒。最常用的化石孢粉粒包埋材料是Epo
n-Araldite或Spurr低粘度樹脂(生產商提供了如何制備不同硬度樹脂的說
明書；美國的EM供應商)。例如，大花粉?；蜴叻劭梢栽跍\的鋁質平底鍋(
直徑為4．ocm)中直接包埋?；叻哿５陌褚部梢詫⒒ǚ哿＜拥揭坏螛?/div>
脂上，樹脂滴位于兩個鍍有聚四氟乙烯的標準顯微鏡玻片之間，并在透射
光下觀察晶片，選擇理想的花粉粒。另一方法適用于小花粉粒或分散樣品
，用吸管把花粉粒吸到纖維素濾器上，接著在瓊脂中對濾器雙面鍍膜。將
這些濾器脫水，并在淺平底鍋中用樹脂逐漸浸透。還有一種方法是將花粉
粒放在小塊瓊脂中，對瓊脂塊用4％的低聚甲醛和2％的鋨酸處理，再用不
同濃度乙醇逐步脫水，隨后移入氧化丙烯中，并用Epon-Araldite包埋。所
有這些方法為了能夠從樹脂晶片中切下一小塊含有花粉粒的塊體，將該塊
體用膠水粘到一根苯乙烯的桿上，并將該桿固定在超薄切片機的卡盤上，
這樣確保切片處于一個理想的方位。斜面可能會出現對花粉粒結構和壁層
厚度的不準確結果，特別是壓型花粉粒，故切片的準確定位特別重要。有
一個恰當的例子正說明了這一點。內網是具真氣囊花粉粒的氣囊內壁延伸
一小段距離而形成的。雖然原氣囊花粉粒表面可能具有與真氣囊型花粉相
似性特征，但是這些氣囊含有從氣囊內壁一直延伸到氣囊本體外表面的細
線。在一個穿過內網的斜切片上，有可能將真氣囊花粉粒誤認為原氣囊型
的花粉粒(Osborn&Taylor，1993)。上述兩種顆粒的識別，有利于解釋花粉
壁的形成，甚至氣囊的演化，同時是系統發育重建中一個潛在的重要特征
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