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本文標(biāo)題:"熒光顯微技術(shù)能夠直接、及時觀察細胞膜的變化"

發(fā)布者:yiyi ------ 分類: 行業(yè)動態(tài) ------ 人瀏覽過-----時間:2013-5-3 5:16:5

 FRET原理是一熒光物質(zhì)(donor)受到特定波長的光線照射后會被激發(fā)而發(fā)出另一特定波長的光,

此能量轉(zhuǎn)移的距離約7-10 nm,在此距離內(nèi)若有一接收者
(acceptor)則此能量會被吸收,而熒光減弱。FRET廣泛應(yīng)用于膜蛋白的研究
藉由donor與acceptor標(biāo)識在欲觀察的分子上,便可由熒光強弱知道兩種
分子結(jié)合與混合程度。Fluorescence quenching與FRET的原理類似,
 
這類熒光分子在高濃度(~70mM)彼此距離接近時會發(fā)生分子之間會發(fā)生self-quenching的現(xiàn)
象而讓熒光減弱,而在低濃度時熒光較強。Fluorescence quenching經(jīng)常被運用到
微胞洩漏實驗,當(dāng)細胞膜上有破洞產(chǎn)生時,如果熒光分子外洩則濃度降低,
因而造成熒光強度變化。FRAP的原理是在細胞膜的局部區(qū)域, 
 
以激光光源集中激發(fā)局部區(qū)域, 讓其造成分子局部的熒光漂白,再來測量熒光回復(fù)的速度。
而從回復(fù)的速度可以知道脂質(zhì)分子擴散速率,進而了解細胞膜相變的機制。
相較于前面所提的熒光技術(shù),熒光顯微技術(shù)是一個能夠直接、及時觀察細胞膜上
變化的技術(shù)。當(dāng)人造膜上有兩種區(qū)塊共存時,
被標(biāo)識的熒光分子會選擇停留在特定的區(qū)塊而產(chǎn)生熒光分部不均勻,
來提供足夠的反差來觀察人造膜上區(qū)塊尺寸大小、形狀與動態(tài)行為
 

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